У крупного рогатого скота, овец и коз, лошадей кровь берут из яремной вены в верхней трети шеи в объёме не менее 5 мл. в пробирку с антикоагулянтом 0,5 М ЭДТА* (200 мкл. на одну пробирку).
Гепарин и другие антикоагулянты использовать нельзя!
Транспортировка крови осуществляется с специальных термо-сумках с хладагентом, главное не заморозить и не сварить кровь.
Иглы перед взятием крови от каждого животного обязательно стерилизуют кипячением.
Кровь от каждого животного берут индивидуальной иглой!
Место взятия крови тщательно дезинфицируют спиртом или 5% раствором йода. Для взятия крови животное фиксируют – привязывают голову животного. Большим пальцем нажимают на вену в нижней трети шеи. Задержка оттока крови вызывает набухание вены в виде толстого шнура. Кровопускательную иглу вводят под острым углом по направлению к голове, продвигая в полость сосуда приблизительно на 1 см.
Кровь в пробирку набирают по стенке пробирки струёй. Пробирка закрывается пробкой и переворачивается несколько раз (для перемешивания с антикоагулянтом). Встряхивание не допустимо! Каждая пробирка должна быть пронумерована (или указан инвентарный номер животного) согласно заранее подготовленной описи.
Образцы с гемолизом или образовавшимся сгустком исследованию не подлежат!
Пробирки с кровью хранить при температуре +4ºС – +8 ºС. Условия обычного холодильника, но не морозильной камеры.
У крупного рогатого скота более эффективным и безопасным является способ забора крови из хвостовой вены. Для взятия крови животное не фиксируют. Хвост животного берут рукой в области средней трети и медленно поднимают вверх. Кровь берут в средней трети тела 2-5 хвостовых позвонков, находящейся на линии, идущей вдоль хвоста и делящей его на 2 симметричные части. Место взятия крови также дезинфицируют спиртом или 5% раствором йода. Иглу вводят под углом 90 до упора на глубину 5-10 мм.
- Для упрощения процедуры забора крови возможно использование одноразовых стеклянных или пластиковых вакуумных пробирок любого доступного производителя уже содержащих жидкий или сухой ЭДТА (нанесённым на внутреннюю стенку пробирки). После взятия крови пробирку необходимо плавно перевернуть несколько раз. Пробирки с кровью хранить при температуре +4ºС – +8 ºС. Важно, кровь в таких условиях можно хранить две недели.*Приготовление 0,5М ЭДТА (рН 8,0). В мерной колбе на 100 мл растворяют 18,62 г этилендиаминтетрауксусной кислоты (молекулярный вес 372,2) в 80 мл дистиллированной воды. Раствором 30%-й натрия гидроокиси доводят рН раствора до 8,0. Затем дистиллированной водой – объём раствора доводят до метки и перемешивают. Хранят в колбе с притертой пробкой при комнатной температуре до 1 года.
ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ: Ознакомиться с методами взятия крови у сельскохозяйственных животных, изучить соотношение и взаимосвязь составных частей крови, получить плазму, сыворотку, дефибринированную кровь и фибрин, определить время свертывания крови при различных температурных условиях.
Работа 1 . Получение крови у животных.
Для взятия крови у животных производят обработку операционного поля (выстригание и выбривание волосяного покрова, протирание кожи спиртом и эфиром), а затем надрезают (прокалывают) кровеносный сосуд или вводят в него иглу определенной формы и диаметра, предварительно подвергнутые стерилизации. Принудительной фиксация животных при взятии крови следует избегать. Для получения крови у мелких животных и птиц иногда прибегают к пункции желудочка сердца.
Лошади крупный и мелкий рогатый скот.
Небольшие количества крови для морфологического анализа у лошадей и крупного рогатого скота получают из ушной вены путем её надреза или прокола инъекционной иглой. Для получения большого количества крови, а также для внутренних вливаний производят пункцию яремной вены на границе верхней и средней трети шеи (рис. 48).
После фиксации животного большим пальцем левой руки сдавливают вену ниже места пункции (у крупного и мелкого рогатого скота накладывают резиновый жгут), затем прокалывают кровопускательной иглой кожу и стенку ванн. Иглу вводят против тока крови под углом 45°. Кровь собирают в стерильный сосуд.
Свиньи.
У свиней малые количества крови получают путем надреза скальпелем большой ушной вены. Центральный, конец сосуда у корня уха зажимают при этом пальцами. Для получения большого количества крови отсекают ножницами или скальпелем отрезок хвоста длиной 1…1.5 см.
А - с левой стороны, Б - с правой стороны.
Рис. 48. Взятие крови у лошади из яремной вены.
По окончании кровопускания рану дезинфицируют, а кончик хвоста сдавливают резиновым кольцом или перетягивают бинтом на 1…2 суток.
Собаки.
Небольшие количества крови у собак (кошек) получают путем надреза уха или прокола мягкой части ступни. Для получения больших порций крови производят пункцию переднепружной плюсневой вены, расположенной на наружной поверхности голени (рис. 49). Животное кладут на бок или фиксируют в станке, конечности сдавливают руками или жгутом ниже коленного сустава. Иглой прокалывают сначала кожу, а затем - стенку вены, насасывают кровь в шприц.
Кролики.
Малое количество крови у кроликов получают путем надреза или прокола вены, расположенной снаружи по тонкому краю уха. Местом кровопускания может служить и грудная вена, расположенная на грудной клетке сбоку. В некоторых случаях прибегают к пункции сердца.
Рис. 49. Пункция переднепружной плюсневой вены у собак.
Птицы.
Небольшие порции крови у кур и индеек получают путем надреза или скарификации гребня (сережек). У гусей и уток делают прокол мякоти ступни. В большом количестве кровь у птиц получают из подкожной под-крыльцевой вены, расположенной на внутренней поверхности крыла. Перья выщипывают, вену сдавливают пальцем в области локтевого сустава, прокол делают под углом на уровне локтевого сгиба.
Заполнить таблицу 14 получения большого и малого количества крови у разных видов животных.
1. ПОЛУЧЕНИЕ КРОВИ У ЖИВОТНЫХ Для взятия крови у животных производят обработку операционного поля (выстригание или выбривание волосяного покрова, протирание кожи спиртом и эфиром), а затем надрезают (прокалывают) кровеносный сосуд или вводят в него иглу, предварительно подвергнутую стерилизации (рис.1). Принудительной фиксации животных при взятии крови следует, по возможности, избегать. Для получения крови у мелких животных и птиц иногда прибегают к пункции желудочков сердца.
Лошади, крупный и мелкий рогатый скот. Небольшие количества крови для анализа у лошадей и рогатого скота получают из ушной вены путем ее надреза или прокола инъекционной иглой. Выступившую кровь насасывают в пипетку или собирают по каплям на часовое стекло, предварительно промытое антикоагулянтом. У овец можно производить, кроме того, пункцию кожной вены, расположенной под внутренним углом глаза.
Для получения больших количеств крови производят пункцию яремной вены на границе верхней и средней трети шеи. После фиксации животного большим пальцем левой руки сдавливают вену ниже места пункции (у крупного и мелкого рогатого скота накладывают резиновый жгут), а затем прокалывают кровопускательной или инфузионной иглой кожу и стенку вены. Иглу вводят против тока крови под углом 45° (рис. 2). Кровь собирают в стерильный сосуд. Для получения крови из глубоко расположенных сосудов (воротной, печеночной, задней полой, общей брыжеечной, рубцовой и др. вен) производят их катетеризацию с помощью нейлоновых или тефлоновых катетеров.
Для взятия крови у крупных животных используют приборы-автоматы. Они имеют разную конструкцию, но в состав их обязательно входят корпус, иглодержатель, держатели для пробирок, ударный механизм с пружиной. (рис. 3).
Свиньи. У свиней малые количества крови получают путем надреза скальпелем большой ушной вены. Центральный конец сосуда у корня уха зажимают при этом пальцами. Для получения больших количеств крови отсекают ножницами или скальпелем отрезок хвоста длиной 1 – 1,5 см. По окончании кровопускания рану дезинфицируют, а кончик хвоста сдавливают резиновым кольцом или перетягивают бинтом на 1-2 суток. У поросят рекомендуют получать кровь путем прокола иглой или микропипеткой орбитального венозного синуса. Животное при этом фиксируют лежа, в спинном положении. За один раз берут от 5 до 30 мл крови.
Рис. 1. Иглы для взятия крови. А-Г – из уха и пальца; Д-Ж – из вены.
1 - съемное лезвие иглы Франка, 2 – головка, 3 –подвижная гайка, 4 – курок
Собаки.
Небольшие количества крови у собак (кошек) получают путем надреза края уха или прокола мягкой части ступни. Для получения больших порций крови производят пункцию передненаружной плюсневой вены, расположенной на наружной поверхности голени. Животное кладут на бок или фиксируют в станке; конечности сдавливают руками или жгутом ниже коленного сустава. Иглой прокалывают сначала кожу, затем стенку вены. Кровь насасывают в шприц.
Рис. 2. Взятие крови у лошади Рис. 3 . Приборы для взятия крови :
из яремной вены. у животныхА – с левой стороны; А – автомат ПКЗ (Зенкова);
Б – с правой стороны Б – автомат ПКК-2 (Крживицкого);В – держатель иглы и пробирки
ПКФ-1 (Филина)
Кролики. Малые количества крови у кроликов получают путем надреза или прокола вены, расположенной снаружи по тонкому краю уха. Животное при этом завертывают в полотенце или сажают в ящик с отверстием для головы; ухо предварительно погружают в теплую воду или протирают ксилолом (спиртом).
Местом кровопускания может служить и грудная вена – v. thoracica externa, расположенная на грудной клетке сбоку. После обработки операционного поля (от локтевого бугра до третьего ребра) вену зажимают пальцем около локтя. Иглу вводят против тока крови.
Иногда прибегают к пункции сердца. Иглу вкалывают в третий межреберный промежуток слева, на расстоянии 3-4 см от наружного края грудины. У кролика можно брать одновременно до 15-20 мл крови.
Морские свинки. Небольшие количества крови у морских свинок получают путем надреза края уха или прокола иглой Франка ступни животного. Для получения больших количеств крови делают пункцию яремной вены (после разреза кожи и препаровки сосуда) или пункцию сердца. Иглу вкалывают у левого края грудины, в точке, где хорошо ощущается сердечный толчок. Направление укола – внутрь к средней линии, глубина прокола 1,5-2 см. Одновременно можно взять до 5 – 10 мл крови.
Крысы и мыши. Для получения крови у крыс и мышей надсекают ухо или срезают кончик хвоста. У крупных крыс можно получать кровь пункцией хвостовой вены. Хвост опускают в теплую воду, затем обсушивают марлей и сдавливают у корня пальцами; в сосуд вводят тонкую иглу. Кровь насасывают в шприц.
Птицы. Небольшие порции крови у кур и индеек получают путем надреза или скарификации гребня (сережек). У гусей и уток делают прокол мякоти ступни. В большом количестве кровь у птиц получают из подкожной
Рис. 4. Внутренняя поверхность крыла кур.
Место пункции подкрыльцовой вены 1 помечено крестиком
подкрыльцовой вены, расположенной на внутренней поверхности крыла. Перья выщипывают, вену сдавливают пальцем в области локтевого сустава, прокол делают под углом на уровне локтевого сгиба (рис. 4).Можно предварительно обнажить сосуд коротким разрезом кожи. Ввиду высокой свертываемости крови у птиц место прокола протирают противосвертывающей жидкостью. Выступившие капли крови переносят пипеткой в бюкс или собирают в центрифужную пробирку с антикоагулянтом. После взятия крови место пункции на несколько минут зажимают тампоном.
У гусей, уток и индеек кровь можно получать из внутренней плюсневой вены, расположенной под кожей на медиальной, поверхности плюсны, ближе к ее плантарному краю. У кур, гусей, индеек можно брать одновременно до 10-15 мл, у голубей – 1-1,5 мл крови.
При необходимости получить у кур артериальную кровь прибегают к пункции сонной артерии (после ее обнажения у наркотизированной птицы) или к пункции левого желудочка сердца. Прокол делают слева в V-образной вырезке грудной кости с направлением иглы к плечевому суставу противоположной стороны (у кур) или под углом 45° к стенке грудной клетки, вперед (у цыплят).
Лягушки. Несколько капель крови можно получить у лягушек при срезании ножницами концов пальцев лапки. Иногда производят пункцию кожной вены, расположенной посередине живота (кожу предварительно надрезают). Можно получать кровь у лягушки и пункцией обнаженного сердца.
Примечание . Кровь у человека получают путем прокола мякоти пальца иглой Франка или специальными копьями-скарификаторами одноразового пользования. Место взятия крови тщательно обрабатывают спиртом и эфиром. После взятия крови к месту прокола прикладывают тампон, смоченный спиртом.
2. ПОЛУЧЕНИЕ СЫВОРОТКИ, ПЛАЗМЫ, ДЕФИБРИНИРОВАННОЙ
КРОВИ И ФИБРИНА
Кровь состоит из жидкой части – плазмы и находящихся в ней во взвешенном состоянии форменных элементов – эритроцитов, лейкоцитоа и тромбоцитов. Для получения плазмы кровь необходимо предохранить от свертывания добавлением антикоагулянтов. Такая кровь после длительного стояния в пробирке или центрифугирования разделяется на плазму (верхний слой) и форменные элементы. Если выпущенную в сосуд кровь не стабилизировать антикоагулянтом, происходит ее свертывание – образование сгустка, содержащего форменные элементы и выпавший в осадок белок фибриноген. Сгусток постепенно уплотняется, стягивается и от него отделяется прозрачная желтоватого цвета жидкость – сыворотка. Сыворотка представляет собой плазму, лишенную фибрина. Схема, иллюстрирующая соотношение составных частей крови, изображена на рис. 5.Если выделить из крови фибриноген механическим путем, то такая кровь теряет способность к свертыванию. Она содержит все составные части, за исключением
фибриногена, и называется дефибринированной кровью.
Цель опыта: 1) изучить соотношение и взаимосвязь составных частей крови, 2) получить плазму, сыворотку, дефибринированную кровь и фибрин.
П
одготовка опыта:
Лошадь зафиксировать в станке. Подготовить операционное поле для пункции яремной вены: Заготовить иглы или автомат для взятия крови, стеклянные цилиндры на 10 – 20 мл, пробирки химические и центрифужные в штативе, колбочку на 50 – 100 мл, стеклянные шарики и антикоагулянты.
В качестве антикоагулянтов можно использовать порошок лимоннокислого или щавелевокислого натрия (20–30 мг на 10 мл крови), раствор щавелевокислого калия и щавелевокислого аммония (7,0г оксалата калия, 4,5г оксалата аммония, 100мл воды) в дозе 0,2 мл на 10 мл крови, этилендиамин тетраусусную кислоту – ЭДТУ в дозе 0,2 мл 0,01% раствора на 10 мл крови. Na-ЭДТУ в дозе 0,5–1 мг на 5 мл крови. Одним из естес твенных антикоагулянтов является полисаха рид гепарин, содержащийся почти во всех тканях организма. Его используют в колич естве 100 ед на 1 мл крови (примерно 2 капли неразведенного гепарина на 10 мл крови).
Рис. 5. Схема основных
Составных частей крови
Ход опыта:
1. В пробирку и цилиндр с антикоагулянтом выпустить по 10 мл крови из яремной вены животного. Закрыв сосуд пальцем или пробкой несколько раз перевернуть его для перемешивания крови. Цилиндр поставить в термостат (кровь лошади – на 1 ч, крупного рогатого скота – на 24-48 ч), пробирку – в центрифугу. Центрифугировать при 3000 об/мин в течение 20-30 мин. Убедиться, что при стоянии или центрифугировании кровь расслаивается на плазму и форменные элементы.
2. В пробирку или цилиндр без антикоагулянта выпустить 10 мл крови животного и поставить ее в термостат при 38°С на несколько часов. Образование кровяного сгустка и частичная ретракция, т.е. его стягивание и самопроизвольное отделение сыворотки, наступает у лошади через 1-3 ч, а полное отделение сгустка – через 12-18 ч. У крупного рогатого скота ретракция протекает значительно медленнее. Из пробирки с полной ретракцией сгустка слить или отсосать сыворотку и сравнить ее с плазмой. Сыворотка имеет желтовато-соломенный цвет и более прозрачна, чем плазма.
3. Положить в стеклянную колбочку 10–12 стеклянных бусинок и выпустить в нее из сосуда животного 20-30 мл крови. Взбалтывать кровь вращательными движениями в течение 10-15 мин. Фибриноген, выпадающий в осадок в виде волокнистых нитей фибрина, оседает на шариках. Профильтровать содержимое колбы через 2 слоя марли. Фильтрат представляет собой дефибринированную кровь, содержащую сыворотку и форменные элементы.
4. Осевшие на шариках нити фибрина отмыть от форменных элементов теплой водой. Он имеет вид белого волокнистого вещества.
5. Определить содержание фибриногена в крови. С этой целы сначала необходимо получить цитратную плазму. В пробирку налить 1 мл 3,8% раствора лимоннокислого натрия и прилить 9 мл крови. Перемешать и отцентрифугировать в течение 20-30 мин при 3000 об/мин. Из полученного слоя плазмы отмерить 1 мл, перенести в другую пробирку, прибавить 0,4 мл 5% раствора CaCl 2 и встряхнуть. После свертывания плазмы образовавшийся сгусток фибрина намотать на стеклянную палочку и, вынув из пробирки, поместить на беззольный фильтр. Сжимая фильтр, получить воздушно-сухой остаток фибрина, который взвесить на торзионных весах. В норме в 1 мл цитратной крови содержится 6-9 мг воздушно-сухого фибрина. При пониженном содержании фибриногена может нарушаться свертываемость крови.
В своей практической деятельности ветеринарным специалистам при выполнение плана противоэпизоотических мероприятий, а также при исключении тех или иных инфекционных заболеваний приходится проводит взятие проб крови от животных. При этом у лошадей, крупного рогатого скота, верблюдов, оленей, овец и коз кровь берут из яремной вены в верхней трети шеи. Иглы для взятия крови обязательно стерилизуются кипячением . Кровь берется от каждого животного отдельной иглой . В последние годы забор крови от животных проводится вакуумными пробирками или одноразовыми шприцами из подхвостовой вены.
1. Шерсть на месте взятия крови тщательно выстригается, кожа дезинфицируется 70% спиртом.
2. При взятии крови специалист должен следить, чтобы кровь стекала по стенке пробирки струей, а не каплями. Кровь, взятая каплями и вспененная, скорее гемолизируется и часто дает неправильные результаты показаний при исследовании. Во время взятия крови ветспециалист должен следить, чтобы кровь не попадала в кормушку и на землю . Для этого ветспециалист при взятие крови из вены должен пользоваться тазиком с дезинфицирующей жидкостью, куда спускают первую порцию крови.
У свиней кровь берется из уха (иглой или шприцем) или из кончика хвоста. Хвост перед взятие крови обмывают водой с мылом и дезинфицируют 70% спиртом, затем кончик отрезают ножницами. После взятия крови кончик хвоста обрабатывают йодом, перевязывают или прижигают.
У птиц кровь берут из вены крыла или гребешка. Брать кровь надо по возможности утром, до кормления животного.
3. Объем: Для серологического исследования от крупных животных кровь берут в количестве 7-10мл, а от мелких животных в объеме 2-4мл.
4. Взятую кровь выдерживают около часа при температуре 30-35 градусов для свертывания, а затем выносят в прохладное помещение для отстаивания .
5. Сроки доставки: сыворотка крови должна быть доставлена в ветлабораторию, в течение первых суток. И в исключительных случаях не позднее третьего дня после ее взятия!!!
6. При пересылке сыворотки на большое расстояние, особенно летом ее необходимо консервировать 5%-ным раствором карболовой кислоты на физиологическом растворе из расчета на каждые 9мл сыворотки 1мл раствора карболовой кислоты или 1-2капли раствора на 1мл сыворотки.
Сыворотку можно консервировать также высушиванием. Для высушивания сыворотку наносят на фильтровальную бумагу размером 5*5см в количестве 0,4мл и выдерживают в комнате при рассеянном свете до полного высыхания . После этого на каждой бумаге с высушенной сывороткой делают соответствующие записи карандашом и завертывают в пергаментную бумагу (каждую пробу отдельно), а затем упаковывают в конверт и в таком виде отсылают в лабораторию.
7. Для серологического исследования в лабораторию особенно от вблизи расположенных хозяйств можно отправлять и цельную кровь, не отделяя сыворотку, но при условии, что в пути ее не будут встряхивать и она не подвергнется гемолизу.
8. Маркировка: на каждой пробе сыворотки крови или крови указывают ее порядковый номер, инвентарный номер животного (кличку животного, фамилию владельца животного).
9. Оформление: к сопроводительному письму на пробы крови, направляемые в плановом порядке для серологического или гематологического исследования, прилагается опись проб в 2-х экземплярах. Смотри приложение №1. (doc)
10. Упаковка и транспортировка: Пробирки с кровью или сывороткой плотно закрывают стерильными пробками и устанавливают для пересылки в строго вертикальном положении (на лицевой стороне посылки вверху должна быть надпись «осторожно-стекло!» и «Верх») . Зимой кровь и сыворотку упаковывают и пересылают так, чтобы они не замерзали .
На сегодня решил сделать еще один пост. И будет он посвящен самому трудоемкому, и самому массовому процессу в нашей ветеринарной жизни - это взятие крови у коров для диагностических исследований, таких как например: лейкоз, бруцеллез, лептоспироз и т. д., и для биохимического исследования в осенне-весенний период.Наши дедушки с бабушками ветеринарной службы брали кровь традиционно, да и сейчас до сих пор так учат в наших ветеринарных ВУЗах - из яремной вены. Но наука и технологии не стоят на месте. Прогрессивные умы человечества постоянно работают над совершенствованием новых способов работ, стороной не обошло и ветеринарное направление.
Всех нас учат в институтах ветеринарии, что кровь нужно брать из яремной вены, в многоразовую стеклянную пробирку, используя многоразовую металлическую иголку разного диаметра.
Взятие крови в стеклянную пробирку
Как видно на верхнем фото, чтобы взять кровь, нужно во-первых зафиксировать животное, наложить на шею резиновый жгут (он нужно чтобы лучше определялась яремная вена). Далее нужно с размаха попасть в вену, пробив кожу моментально. И только потом подставлять пробирку. В чем сама неудобность - затрата времени, средств, сил, рабочей силы.
Но как выше писал я уже, человечество не стоит на месте, и постоянно совершенствует свои подходы к работе, попутно облегчая их.
Не так давно, а именно, в 2000-х годах к нам приехали иностранцы, и рассказывали о том что мы тут древние, ничего не знаем, и будем вас учить. И действительно, показали как нужно брать кровь у коров по современным стандартам. А именно, в вакуумную пробирку одноразового использования (см. фото ниже
)
взятие крови у коровы из хвостовой вены в вакуумную пробирку
Скажу сразу, сейчас до сих пор есть противники такого метода - метода взятия крови из хвостовой вены, они считают, что является классикой, то не умирает никогда, ну как по Ленину.
Хотя, как вы можете видеть на фото, маленькая вакуумная пробирка, нет лишней или даже дополнительной фиксации животного(!)
что очень важно для проведения зооветеринарных мероприятий. На такую процедуру взятия крови уходит максимум полминуты-минута, в то время, как при старом методе взятия крови, иногда уходит и до десяти минут!
Следующий фактор который нужно отнести в плюс - человек не контактирует с кровью, а значит риск заболеть лейкозом или бруцеллезом он минимален, или вообще исключен
Следующий фактор - кровь под вакуумом сама идет в пробирку, и занимает это секунды.
Следующий фактор - животное спокойнее стоит, когда у нее кровь берут из хвостовой вены, нежели их яремной вены.
Следующий фактор - кровь не попадает во внешнюю среду и на объекты внешней среды (подстилка, кормушка, поилка и т.д.) - это я указал в аспекте, если животное может быть больным лейкозом, бруцеллезом и т. д.
Следующий фактор - стоимость одной пробирки вместе с иголкой одноразовой 8 рублей. Да и не так часто приходится брать кровь - один-два раза в год (массово при ветеринарных обработках), да и в текущем плане - при биохимическом исследовании крови у коров. Раньше нужно было: намыть стеклянных пробирок ну грубо говоря пробирок 600-1000, затем их прокипятить, затем уложить, потом после того как слили кровь их снова помыть и так все по кругу. Да и бьются они часто, и травмирование ветеринарного работника и самого животного тоже часто бывает.
Следующий фактор - Не надо переливать кровь, после того как она отстоится. Сразу поставили в специальный планшет и отправляем в лабораторию.
Следующий фактор - подписывать нужно саму пробирку, и это очень удобно, в то время, как раньше это было очень трудоемко (нужно было нарезать специальные резиночки, потом одеть их на стеклянные пробирки, затем когда кровь возьмут подписать, а если нет резиночки, то бумажку заворачивали в ватку и сверху вводили в стеклянную пробирку).
Ну вот, вроде все рассказал, и это будет не последний мой пост. Очень много интересного вас ждет впереди!